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掌握熒光顯微鏡性質(zhì)根據(jù)ELISA的原理,對(duì)細(xì)胞復(fù)染的技巧
一般要根據(jù)熒光顯微鏡的原理和性質(zhì)來確認(rèn)使用的激發(fā)塊類型
1）熒光原理是用短波長(zhǎng)的光去激發(fā)標(biāo)本，標(biāo)本產(chǎn)生長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光。在光譜上， 461nm是藍(lán)色光，530nm是綠色光
345nm是近紫外光（肉眼看不見）。

2)DAPI染料染細(xì)胞核，應(yīng)使用激發(fā)波長(zhǎng)359nm的紫外光去激發(fā)，選擇吸收波長(zhǎng)461nm的濾色鏡來觀測(cè)藍(lán)色熒光。

3)染細(xì)胞質(zhì)的綠色染料就該用激發(fā)波長(zhǎng)345nm的近紫外光去激發(fā)，選擇吸收波長(zhǎng)530nm的濾色鏡去觀察綠色熒光。

4）需明白你所使用的熒光激發(fā)塊，一般情況下熒光顯微鏡激發(fā)塊有窄帶和寬帶兩種。
（1）如你所用的近紫外激發(fā)塊是寬帶的，那么在熒光顯微鏡下應(yīng)可以同時(shí)看到藍(lán)色的細(xì)胞核和綠色的細(xì)胞質(zhì)；
如只看到綠色細(xì)胞質(zhì)，就很可能是你的激發(fā)塊選擇錯(cuò)誤，你也許選擇了藍(lán)光激發(fā)，所以只能看見綠色的細(xì)胞質(zhì)。
（2）如你所使用的近紫外激發(fā)塊是窄帶的，無論怎樣你將只能看到藍(lán)色或綠色其中一種，看主要看選什么波長(zhǎng)激發(fā)。