食品微生物分析圖像顯微鏡-微生物檢測儀器
食品中微生物分離的定性方法
這種方法的主要目的是確定樣品中是否含有特定病原體的活細(xì)胞或
芽胞。在必要時，食品中多種病原體通過特定的分離程序被檢測，如沙
門菌、大腸桿菌0157：H7、單核增生李斯特菌、霍亂弧菌和志賀菌。對
于另一些病原體，如腸致病性大腸桿菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌和空腸彎
曲桿菌，一般不需分離程序，而使用的是計數(shù)方法。
分離程序一般包含幾個步驟，如非選擇性預(yù)富集，緊接著選擇性富
集，然后在含選擇性和鑒別性試劑的瓊脂培養(yǎng)基上檢測。假定當(dāng)與相關(guān)
聯(lián)的微生物相比較時，食品通常包含低數(shù)量的病原菌，并且病原菌還可
能處于受損傷狀態(tài)。食品樣品(如25mL)首先在非選擇性的培養(yǎng)液中(225
mL)預(yù)富集培養(yǎng)一段時間，使受損細(xì)胞得以修復(fù)，繼而使其增殖以達(dá)到
中等數(shù)量(與其他許多相關(guān)微生物一起)。將部分預(yù)富集培養(yǎng)液接種至選
擇性富集培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)期間，特定的病原體和有親緣關(guān)系
的微生物被認(rèn)為將選擇性生長并達(dá)到較高的數(shù)量，同時許多其他微生物
不會生長。取少量的富集培養(yǎng)液(約0．01 mL)劃線接種到選擇性鑒別
瓊脂培養(yǎng)基表面，然后在特定溫度下培養(yǎng)一定時間，直到形成菌落。根
據(jù)不同的菌落特性，能夠初步檢測到病原體的存在。
它一般被認(rèn)為是一個假設(shè)性檢測。為進(jìn)一步證實(shí)試驗結(jié)果，對特征
性菌落的菌體進(jìn)行純化并使用推薦的方法對其生化反應(yīng)性、與特異性抗
體的血清學(xué)反應(yīng)特征、免疫色譜側(cè)流試驗或聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR，后文
論述)等進(jìn)行鑒定。常規(guī)的分離病原體方法可能要花10～12d時間，這取
決于特定的微生物種類。
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