提高熒光顯微鏡CCD圖像截取影像清晰度
常見的細(xì)胞影像系統(tǒng)包含熒光顯微鏡及雷射共軛焦熒光顯微系統(tǒng),但這兩種系統(tǒng)在活細(xì)胞影像觀察上仍有其限制。
熒光顯微鏡CCD擷取的訊號包括焦平面上的訊號及離焦訊號,由于每個面的訊號交互作用并疊加,故所得之影像相當(dāng)模糊,
也無法得知細(xì)胞內(nèi)各種物質(zhì)的3D立體空間構(gòu)造。
雷射共軛焦熒光顯微系統(tǒng)則在偵測器光電倍增管(PMT)前加上pinhole濾除非焦平面上之訊號而使影像清晰,
但pinhole也會剔除許多訊號,對于訊號較弱的樣品有取像上的困難。而其掃瞄方式是以單點(diǎn)連續(xù)掃瞄再組成完整影像,
所以取像速度過慢也是其缺陷;再加上使用的光源是能量極強(qiáng)的雷射光,長時間照射樣品造成細(xì)胞光漂白、光傷害而造成細(xì)胞死亡。
將影像經(jīng)由電腦精密運(yùn)算以提高影像清晰度及對比的先進(jìn)影像處理技術(shù)。在顯微鏡上搭配此技術(shù),
不但能使影像更清晰、減少樣品光傷害,且能延長樣品觀察時間,甚至還原樣品之3D立體資訊。
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