菌種生長特征-酵母菌種涂布培養(yǎng)基分析顯微鏡
鑒定與確認
對于通過富集或直接涂布于低pH培養(yǎng)基上而形成的菌落必須用合適
的分析技術(shù)來確認其是否為脂環(huán)酸芽孢桿菌。采用何種合適分析技術(shù)是
主要的爭論點。對于確定所分離的菌種是酵母還是其他脂環(huán)酸芽孢桿菌
,以及對于確定該分離菌是否為革蘭陽性芽孢菌,進行鏡檢是必需的。
分離菌落是否產(chǎn)芽孢可能要進一步在其他培養(yǎng)基上涂布培養(yǎng)后,再進行
芽孢染色,然后鏡檢來進行確定。
起確認作用的菌種生長特性包括:在較高溫度(45~55℃)下能在低
pH培養(yǎng)基中生長,同時不能在中性pH培養(yǎng)基如常規(guī)平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基
或未酸化基礎(chǔ)培養(yǎng)基上生長,也不能在低溫下生長。還有一種可行實驗
方案是將可疑菌落分別劃線于低pH和中性pH兩組平板上,然后將一組平
板置于45—50℃下培養(yǎng),將另一組平板置于20—25℃下培養(yǎng)適當(dāng)時間。
如果在低pH瓊脂培養(yǎng)基中在45℃下能生長,在25't2時在低pH瓊脂培養(yǎng)
基上少量或不生長,同時在其他平板上任意溫度下均不能生長,那么該
菌可能是脂環(huán)酸芽孢桿菌。最終確認還需進一步的檢測。
樣品經(jīng)稀釋后進行熱休克處理并在40~55℃下培養(yǎng)3~7d,如不能
迅速進行熱休克處理或處理不充分應(yīng)加入某種酵母/霉菌抑制劑。培養(yǎng)
結(jié)束時,將樣品在合適培養(yǎng)基上劃線并在無氧條件45~50℃下培養(yǎng)數(shù)天
。若有菌落形成可說明可能有脂環(huán)酸芽孢桿菌存在,盡管還需進一步分
析來進行確認。
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