激光細(xì)胞技術(shù)能提高樣品檢測(cè)效率-疫熒光檢測(cè)
人們還評(píng)價(jià)了采用激光掃描細(xì)胞技術(shù)，結(jié)合微分干涉對(duì)比(DIC
)確認(rèn)的免疫熒光檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用，并與隱孢子蟲卵囊人工顯微鏡
計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行了比較。在30～230個(gè)的添加水平下卵囊的回收率達(dá)
到了50％。與傳統(tǒng)顯微鏡觀察相比，激光掃描細(xì)胞技術(shù)能提高樣品
處理量，避免操作人員主觀性和觀察疲勞。
盡管這些方法可以對(duì)環(huán)境水樣進(jìn)行分析，但還沒(méi)有確證它們能
否在食品基質(zhì)中應(yīng)用。可能涉及寄生蟲傳播的果蔬與食品是多種多
樣的，這樣僅用一種方法很難實(shí)現(xiàn)寄生蟲的分離。分子診斷檢測(cè)技
術(shù)也是很復(fù)雜的一種方法，因?yàn)槭称分幸种苿┑拇嬖跁?huì)掩蓋其中的
寄生蟲。
還可以開發(fā)免疫檢測(cè)方法來(lái)對(duì)水樣中的隱孢子蟲進(jìn)行鑒定。有
一種間接免疫熒光檢測(cè)方法對(duì)食品基質(zhì)中隱孢子蟲的檢測(cè)非常有用
舊L“一。
適用于隱孢子蟲的絕大多數(shù)純化技術(shù)也適用于環(huán)孢子蟲的純化
(Ortega，私人通信)。隱孢子蟲所用的蔗糖和氯化銫梯度離心也可
用于環(huán)孢子蟲。業(yè)已證明，水過(guò)濾系統(tǒng)也能濃縮水源水樣中的環(huán)孢
子蟲。到目前為止，環(huán)孢子蟲的單克隆抗體還沒(méi)能制備出來(lái)。不僅
僅是因?yàn)槁涯矣邢蓿€因?yàn)槁涯壹?xì)胞壁的抗原特性很弱。用包被了
凝集素WGA的磁珠來(lái)進(jìn)行處理已證明是一種很有用的方法。
人們已采用了各種不同的臨床檢測(cè)方法來(lái)用于環(huán)孢子蟲的鑒定
。對(duì)環(huán)境樣品進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，自身背景熒光被證明是很有用的，盡管
這種檢測(cè)方法不具有專一性。最初用于臨床樣品分析的PCR法也適
用于食品基質(zhì)；但是，其他艾美耳球蟲也可得到與環(huán)孢子蟲相同的
擴(kuò)增產(chǎn)物。可采用Mnll酶的限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性來(lái)區(qū)分環(huán)孢子蟲
和艾美耳球蟲。利用PCR技術(shù)對(duì)環(huán)孢子蟲進(jìn)行分析的最大挑戰(zhàn)是如
何從很少數(shù)量的卵囊中提取需要的DNA，以及如何控制出現(xiàn)的PCR抑
制劑。已經(jīng)開展了各種各樣的研究方法，包括基質(zhì)螯合、反復(fù)凍融
處理、FI'A膜與DNA提取試劑盒等o。研究者還利用不涉及抽提的基
于過(guò)濾的實(shí)驗(yàn)方案來(lái)制備PCR所需要的DNA模板
|
百度
萬(wàn)網(wǎng)
Copyright 2005 - 2017
網(wǎng)站地圖
硬度計(jì)技術(shù)
硬度計(jì)新聞
硬度計(jì)鏈接
華東華南地區(qū)
