微生物劃線技術(shù)形態(tài)特征和試驗-乳糖發(fā)酵菌
培養(yǎng)和生化特性
對培養(yǎng)基、氣體條件和其他特性的選擇,是由分離的疑似病原
菌決定的 很多病原菌的常規(guī)分離采用接種血平板和麥康凱瓊脂培
養(yǎng)平板的方法,在37℃培養(yǎng)24~48小時。
細菌診斷學所用培養(yǎng)基,營養(yǎng)瓊脂是基礎(chǔ)培養(yǎng)基,為易培養(yǎng)菌
生長提供必需的營養(yǎng) 然卡次分離。根據(jù)細菌在血平板和麥康凱
培養(yǎng)基上的乍長情況和反應(yīng).可初步鑒定多種細菌性病原一血平板
支持大部分病原的生長,適合于常規(guī)的初次分離:選擇性培養(yǎng)基可
用于特定微生物的分離:有些培養(yǎng)基的設(shè)計是基于生化反應(yīng).根據(jù)
形成的細菌菌落特征進行鑒定,麥康凱瓊脂培養(yǎng)基含有膽鹽.可選
擇性培養(yǎng)多種革蘭陰性細菌。該培養(yǎng)基含乳糖,以中性紅作為pH指
示劑。如果微生物在此培養(yǎng)基上牛長并發(fā)酵乳糖.酸性產(chǎn)物就會使
培養(yǎng)基變成粉紅色j非乳糖發(fā)酵菌可代謝培養(yǎng)基中的蛋白胨,產(chǎn)生
堿性產(chǎn)物,使培養(yǎng)基和菌落變?yōu)榈S色。
接種平板應(yīng)采用劃線技術(shù).這樣更易于分離菌落的生長;一由
于臨床樣本可能含有微生物污染,因此,該技術(shù)是鑒定病原的必需
步驟。污染物可能來源于正常菌群或環(huán)境、要最終確定病原,需對
所分離的菌落進行亞培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)物,進而進行生化鑒定或其
他檢測。
形態(tài)特征和生化試驗可對細菌性病原進行初步鑒定。其他有助
于鑒定的特征包括在血平板和麥康凱瓊脂上產(chǎn)生的色素和氣味,以
及在血平板上出現(xiàn)的溶血等。細菌的最終鑒定通?;谏囼?、
分子檢測或血清學方法。某些微生物的鑒定還需進行其他一些檢測
。-生化鑒定技術(shù)
過氧化氫酶是一種由多種需氧菌和兼性厭氧菌產(chǎn)生的酶,其可
將過氧化氫分解為氧氣和水。氧化酶試驗陽性表明.在細菌細胞內(nèi)
存在細胞色素氧化酶C。在氧化一發(fā)酵培養(yǎng)基上的反應(yīng),可用于鑒
定某些病原菌對氣體的需求。
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