電泳儀器的組成以及脂類層析分離實驗-生物顯微鏡在許多方面薄層層析與紙層析相象,但它可以使用多種 材料甚至混合物作為支持基質(zhì),這是它的優(yōu)點。在支持基質(zhì) 中可以加入熒光染料以助鑒定斑點。根據(jù)所用支持物的性質(zhì),分離的機(jī)制可以是吸附層析,離子交換層析,分配層析或 凝皎過濾。這種方法非??焖?,許多分離能夠在1小時內(nèi)完 成。斑點非常致密,有可能&出在紙上查不出昀低濃度化合脂類的薄層層析分離原理生物材料中的脂質(zhì)是復(fù)雜的混合物,先用溶劑提取把它 們分成若千組,然后用薄層層析把每一組中的各種成分分開。 根據(jù)所研究的脂類選擇溶劑,但一般地說,中性脂質(zhì)用非極性 溶劑,帶有電荷的脂質(zhì)用極性溶劑。許多支持基質(zhì)皆可用于 脂類的分離,選擇吸附劑時的主要根據(jù)是要分離那一組的脂 質(zhì)和使用什么樣的溶劑。用得最多的是硅膠,其分離的機(jī)制 是吸附作用和分配作用。在下面實驗里,脂類依極性分組,每組里包括有一些代表 性的標(biāo)準(zhǔn)品。對一些天然油脂進(jìn)行檢査,以確定其成分。電泳儀器 電泳儀器由兩個電極槽構(gòu)成。電泳支持物 通過濾紙或紗布墊和兩槽相連。每一電極榷都分隔成兩室, 兩室之間由棉花條或石棉條溝通。其中一室安裝有白金電 極,另一室和電泳支持物接觸。由于電泳時電極附近的PH 會發(fā)生變化,就是使用有緩沖能力的溶液也是如此,所以將電 極槽分隔成兩室,以保證在電泳支持物附近pH的變化減少 到最低程度。電泳支持物和綏沖液之間,則是依靠幾層用緩 沖液飽和的 3MM濾紙或紗布接通的。做這種連 接時,應(yīng)使這段距離上的電勢降很小。
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