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熒光顯微鏡檢基本技術,動物細胞涂片檢測儀器 熒光顯微鏡檢術用于兩種基本的技術，即直接FA法和間接FA法。直接法是將待檢的材料涂片固定，用含有特異抗體的結合球蛋白試劑浸漬。將浸滿試劑的涂片放在溫室內在37℃培育30—60min。然后將涂片洗兩次，第工一次用緩沖生理鹽水洗5一lOmin。再用自來水洗5一lOmin，將沒有結合的球蛋白全部洗去。滴一滴緩沖甘油于涂片上，加蓋無熒光的蓋玻片。涂片即可用熒光顯微鏡檢查。 間接法是將涂片先用未標記的抗血清處理，這稱為初次結合作用。操作方式與直接法完全一樣。涂片經培育與洗滌之后，加初次反應所用同源動物的血清球蛋白用熒光素標記的抗球蛋白抗體。涂片再培育和洗滌，熒光素顯示抗原與初次反應使用未標記特異抗體之間反應情況。如抗原與特異抗體未發(fā)生結合，則隨后加的熒光素標記的抗球蛋白，因沒有和特異抗體的球蛋白結合而不產生熒光。 間接法的優(yōu)點是需用標記抗血清的量較少。如果所有診斷用抗血清都是用單獨一種動物——例如家兔生產的，則僅需要熒光素標記的抗兔球蛋白抗體。這種血清是將兔球蛋白注射另一種動物制備的。 許多標記的抗血清如聽裝的抗兔球蛋白抗體和未標記的特異抗血清都已有商品出售，鑒于生產標記抗血清比較復雜，而且花費時間，可以購買成品使用。
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