熒光顯微技術在植物微生物學研究中的應用 植物微生物生態(tài)學家面臨的挑戰(zhàn)在于在微生態(tài)的空間水平上研究細菌細胞的生命行為。雖然熒光蛋白質(zhì)與共焦顯微技術的出現(xiàn)大大推動了細胞成像技術的發(fā)展并用于研究植物環(huán)境中的細菌,但與真核活細胞的蛋白質(zhì)動力學研究中的熒光成像技術的最近進展[如FRET, FRAP(光漂白后熒光回收)、FLIP(光漂白熒光丟失)與FCS(熒光關聯(lián)光譜)]相比,很明顯這些研究技術仍然處于初期階段。由于細菌細胞比較小,所以成像要求熒光信號要強,同時在熒光顯微鏡下進行時間推移研究時很難不會改變細菌細胞所處的物理化學微環(huán)境,這些因素都會限制熒光顯微技術在植物微生物學研究中的應用。 還有其他顯微技術涌現(xiàn)出來用于完全含水細胞的觀察,在提高我們對自然生境中細菌行為的研究能力方面有很大的應用潛力。 原子力顯微技術(AFM)可以用來測定尖銳探針和樣品表面之間的作用力,從而提高了我們觀察微觀世界的能力。AFM以無與倫比的高分辨率用于開展以下研究:單個細菌表面狀況和各種各樣的細菌粘附因子,研究和定量測定微生物對基質(zhì)的粘附力,測定細菌細胞壁的彈性 掃描透射X射線顯微術(STXM )是一項近年來發(fā)展起來的技術,該技術利用軟X射線吸收譜能在高分辨率下定址提供關于樣品的詳細的化學信息,是最近研究生物膜中蛋白質(zhì)、脂類、糖類和核酸等物質(zhì)的分布情況的一項最新技術。STXM還可用于研究細菌生物化學與細菌所在的植物表面的化學環(huán)境,從而更好地了解生境中,細菌的生理現(xiàn)象。因此,顯微技術的發(fā)展在不斷為我們提供強有力的工具來研究植物上細菌的生物學、植物微生物菌相之間以及與植物宿主之間的相互作用的基本問題。
|