掃描式熒光顯微鏡應(yīng)用于分子生物學(xué)
無孔徑近場掃描式顯微術(shù)于螢光影像之研究
傳統(tǒng)的光纖式近場光學(xué)顯微鏡受到截止效應(yīng)、熱傷害等問題影響,造成解析度有所限制,
因此可開發(fā)無孔徑的近場光學(xué)掃描式顯微鏡(apertureless near-field scanning optical microscope,aNSOM)來突破。
其原理主要藉著原子力顯微鏡(atomic force microscope,AFM)的探針與入射光場作用,產(chǎn)生區(qū)域電場強(qiáng)化的效應(yīng),
與樣品作用后產(chǎn)生一有效散射場。論文主要的研究是以AFM為基礎(chǔ),研制一套aNSOM,
期望其光學(xué)空間解析度可達(dá)到10nm以下,并將其應(yīng)用于螢光樣品的影像量測。
研發(fā)之a(chǎn)NSOM由于其收光的顯微物鏡位于遠(yuǎn)場偵測干涉后的高頻干涉信號,
其信號包含針尖與奈米結(jié)構(gòu)作用后的近場光學(xué)信號及遠(yuǎn)場的背景雜訊,為了增加影像的訊噪比(signal-to-noise ratio,SNR),
利用距離調(diào)變技術(shù)且搭配自差式干涉(homodyne interferometry)與外差式干涉(heterodyne interferometry)系統(tǒng)擷取信號;
其中外差式干涉技術(shù)多引入一道可控之參考信號,對于影像之SNR之提昇比自差式干涉更有效。
另外,論文中也針對近場螢光影像作相關(guān)之討論與量測,并分析探針與螢光分子的電場交互作用及螢光信號的擷取,
期望未來可將本系統(tǒng)應(yīng)用于分子生物學(xué),得到分子尺度的醫(yī)學(xué)螢光影像。
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