熒光顯微鏡的發(fā)明應(yīng)用和原理簡介
熒光顯微鏡原理
熒光顯微技術(shù)是在 1904 年由德國的顯微鏡操作人員 K?hler 所發(fā)明,他發(fā)現(xiàn)某些
分子在短波長的紫外光照射之下,會放出長波長的熒光,由此開始熒光顯微技
術(shù)。而到了 1941 年 Coons 發(fā)展出熒光抗體技術(shù)(fluoresces antibody technique),
利用熒光顯微鏡的高靈敏度去觀察抗原跟抗體的反應(yīng),此后顯微熒光技術(shù)才受到
重視與廣泛的應(yīng)用。
熒光顯微鏡,熒光的激發(fā)光光源通常是汞燈或是激光,光源波長須配合熒光分子的吸收
特性并搭配特定的慮光片。由光源發(fā)出的光經(jīng)由
Excitation filter 過慮只剩下熒光分子吸收最強波段的激發(fā)光(以藍光表示),
而激發(fā)光照射樣品產(chǎn)生熒光(以綠光表示),物鏡將會收集所有光的資訊,
再經(jīng)由 Barrier filter 過慮掉其他雜光,留下有用的熒光資訊
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