提高熒光顯微鏡CCD圖像截取影像清晰度
常見的細胞影像系統(tǒng)包含熒光顯微鏡及雷射共軛焦熒光顯微系統(tǒng),但這兩種系統(tǒng)在活細胞影像觀察上仍有其限制。
熒光顯微鏡CCD擷取的訊號包括焦平面上的訊號及離焦訊號,由于每個面的訊號交互作用并疊加,故所得之影像相當模糊,
也無法得知細胞內各種物質的3D立體空間構造。
雷射共軛焦熒光顯微系統(tǒng)則在偵測器光電倍增管(PMT)前加上pinhole濾除非焦平面上之訊號而使影像清晰,
但pinhole也會剔除許多訊號,對于訊號較弱的樣品有取像上的困難。而其掃瞄方式是以單點連續(xù)掃瞄再組成完整影像,
所以取像速度過慢也是其缺陷;再加上使用的光源是能量極強的雷射光,長時間照射樣品造成細胞光漂白、光傷害而造成細胞死亡。
將影像經由電腦精密運算以提高影像清晰度及對比的先進影像處理技術。在顯微鏡上搭配此技術,
不但能使影像更清晰、減少樣品光傷害,且能延長樣品觀察時間,甚至還原樣品之3D立體資訊。
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