在熒光顯微鏡下觀察尺寸小于光學(xué)極限物體
由于觀察細(xì)胞影像必須透過(guò)顯微鏡等硬體，一旦訊號(hào)透過(guò)光學(xué)系統(tǒng)，必然會(huì)有訊號(hào)遭到扭曲或損失，
此過(guò)程稱(chēng)為convolution。若能知道點(diǎn)光源在光學(xué)系統(tǒng)下被扭曲的狀況，便可用數(shù)學(xué)方式將模糊的xyz訊號(hào)還原并組成完整影像，
此過(guò)程稱(chēng)為Deconvolution。
至于影像被顯微鏡convolution成什么樣子呢？只要在熒光顯微鏡下觀察尺寸小于光學(xué)極限的熒光珠子(約50~200 nm)，
則每顆珠子可視為一點(diǎn)光源，其經(jīng)過(guò)顯微鏡發(fā)散后得到的影像稱(chēng)為PSF (point spread function)。PSF是一個(gè)3D函數(shù)，
描述的是點(diǎn)光源在xyz軸上被模糊的情形，而一個(gè)生物樣品的訊號(hào)又可視為許多個(gè)點(diǎn)光源的PSF的集合。
根據(jù)上述，以PSF為基礎(chǔ)，將影像進(jìn)行Deconvolution后，不僅能增加訊號(hào)強(qiáng)度，也能改善訊雜比、提高對(duì)比及解析度。
目前市面上已有以Deconvolution為基礎(chǔ)的高階影像系統(tǒng)，除了使用Deconvolution技術(shù)，系統(tǒng)也可搭配其他硬體，
包含使用CCD快速的擷取影像、能減少光對(duì)活細(xì)胞樣品的傷害的光源、精準(zhǔn)的全自動(dòng)化xyz載物臺(tái)等，可以簡(jiǎn)易得到清晰的活細(xì)胞影像。
這些先進(jìn)的影像系統(tǒng)，還可以全自動(dòng)進(jìn)行多色觀察、時(shí)序拍攝、自動(dòng)對(duì)焦、多點(diǎn)拍攝、細(xì)胞追蹤，
亦可依需求加裝雷射進(jìn)行photoactivation、FRET、FRAP、TIRF等實(shí)驗(yàn)，為活細(xì)胞影像研究領(lǐng)域提供了完整且便利的先進(jìn)工具。
|
華東華南地區(qū)
